Transfection Efficiency - Actin and Integrin Double Transfection
Cellules HeLa transfectées avec des plasmides d'intégrine (orange/TRITC) et d'actine (rouge/Cy5), avec en complément un marquage nucléaire au DAPI (bleu) et un marquage membranaire à l'agglutinine de germe de blé (vert/FITC). Ce jeu de données montre comment déterminer l'efficacité de transfection pour des transfections à un seul et à deux plasmides. Il révèle une efficacité de transfection relativement faible, soulignant l'intérêt de Cytely pour l'optimisation des méthodes.
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Méthodologie
Cellules HeLa transfectées avec des plasmides d'intégrine et d'actine. Imagerie de fluorescence à quatre canaux : DAPI (bleu, noyaux), FITC/agglutinine de germe de blé (vert, membrane), TRITC/intégrine (orange), Cy5/actine (rouge).
Exemples d'utilisation
Quantifying single-plasmid transfection efficiency. Identifying double-positive cells expressing both plasmids. Optimizing transfection protocols. Multi-parameter fluorescence analysis.
Notes techniques
Low transfection efficiency makes this an excellent dataset for demonstrating the importance of protocol optimization. Sequential gating allows precise identification of single-positive and double-positive populations.
Essais de ce jeu de données
Cell Identity, Expression & Population Analysis
Efficacité de transfection
Quantifie la fraction de cellules exprimant un ou plusieurs constructions transfectées.
Cell Growth, Survival & Fitness
Comptage cellulaire et viabilité
Compte le nombre total de cellules et les classe comme vivantes ou mortes selon l'intensité des marqueurs, fournissant la mesure la plus fondamentale pour les expériences de toxicité et de dose-réponse.
Cell Morphology & Phenotypic Profiling
Morphologie cellulaire et profilage phénotypique
Mesure la taille, la forme et l'intensité de fluorescence de cellules individuelles à travers de multiples marqueurs.
Cell Identity, Expression & Population Analysis
Pureté d'échantillon et contrôle qualité
Identification et quantification des contaminants dans les préparations cellulaires
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