Cell Cycle Analysis - Mitotic Cells in HeLa Cultures
Classification des stades du cycle cellulaire dans des cellules HeLa au moyen d'une analyse fondée sur la morphologie avec un simple marquage nucléaire standard. Ce jeu de données démontre l'identification des phases du cycle cellulaire (G0/G1, S/G2, M) à partir de la morphologie nucléaire, sans colorants spécialisés. Il a permis d'isoler avec succès 164 cellules mitotiques (3 %) parmi environ 5 500 cellules au total grâce à un gating séquentiel fondé sur les caractéristiques nucléaires.
Méthodologie
Cellules HeLa cultivées dans des lames ibidi à 8 puits et fixées au PFA à 4 % pendant 15 min. Cellules colorées au Hoechst 33342 (marqueur nucléaire) et à la Phalloïdine-Alexa Fluor 488 (cytosquelette d'actine). Images acquises au moyen d'un microscope à grand champ Nikon TI2 avec DIC.
Exemples d'utilisation
Complex cell cycle analysis without specialized dyes (e.g., EdU, BrdU). Retrospective analysis of existing datasets. Sequential gating to isolate mitotic cells with high purity. Morphological profiling of cell cycle stages.
Notes techniques
Key morphological features used: Area, Circularity, Mean DAPI Intensity, Major Axis Length, Minor Axis Length. Final gating based on nuclear elongation (Major vs. Minor Axis Length) was critical for removing contaminating interphase cells. Distribution: G0/G1 (65%), S/G2 (23%), Mitosis (3%), Other/Debris (9%).
Essais de ce jeu de données
Cell Morphology & Phenotypic Profiling
Morphologie cellulaire et profilage phénotypique
Mesure la taille, la forme et l'intensité de fluorescence de cellules individuelles à travers de multiples marqueurs.
Cell Growth, Survival & Fitness
Comptage cellulaire et viabilité
Compte le nombre total de cellules et les classe comme vivantes ou mortes selon l'intensité des marqueurs, fournissant la mesure la plus fondamentale pour les expériences de toxicité et de dose-réponse.
Cell Growth, Survival & Fitness
Analyse du cycle cellulaire
Classe les cellules dans les phases G0/G1, S/G2 et M à l'aide de la morphologie cellulaire et de l'intensité du marquage de l'ADN, en préservant le contexte spatial contrairement à la cytométrie en flux.
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