Cell Cycle Analysis - Mitotic Cells in HeLa Cultures
Clasificación de las etapas del ciclo celular en células HeLa mediante análisis basado en la morfología utilizando únicamente tinción nuclear estándar. Este conjunto de datos demuestra la identificación de las fases del ciclo celular (G0/G1, S/G2, M) usando la morfología nuclear sin colorantes especializados. Se aislaron con éxito 164 células mitóticas (3 %) de ~5.500 células totales mediante gating secuencial basado en características nucleares.
Metodología
Células HeLa cultivadas en portaobjetos ibidi de 8 pocillos y fijadas con PFA al 4 % durante 15 min. Células teñidas con Hoechst 33342 (tinción nuclear) y Phalloidin-Alexa Fluor 488 (citoesqueleto de actina). Imágenes adquiridas con un microscopio de campo amplio Nikon TI2 con DIC.
Ejemplos de uso
Complex cell cycle analysis without specialized dyes (e.g., EdU, BrdU). Retrospective analysis of existing datasets. Sequential gating to isolate mitotic cells with high purity. Morphological profiling of cell cycle stages.
Notas técnicas
Key morphological features used: Area, Circularity, Mean DAPI Intensity, Major Axis Length, Minor Axis Length. Final gating based on nuclear elongation (Major vs. Minor Axis Length) was critical for removing contaminating interphase cells. Distribution: G0/G1 (65%), S/G2 (23%), Mitosis (3%), Other/Debris (9%).
Ensayos en este conjunto de datos
Cell Morphology & Phenotypic Profiling
Morfología celular y perfilado fenotípico
Mide el tamaño, la forma y la intensidad de fluorescencia de células individuales a través de múltiples marcadores.
Cell Growth, Survival & Fitness
Recuento y viabilidad celular
Cuenta el número total de células y las clasifica como vivas o muertas según la intensidad del marcador, proporcionando la lectura más fundamental para experimentos de toxicidad y de dosis-respuesta.
Cell Growth, Survival & Fitness
Análisis del ciclo celular
Clasifica las células en fases G0/G1, S/G2 y M utilizando la morfología celular y la intensidad de la tinción de ADN, preservando el contexto espacial a diferencia de la citometría de flujo.
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