Niemand veröffentlicht ein Paper über Transfektionseffizienz. Niemand erhält dafür Fördermittel. Doch jedes CRISPR-Experiment, jede Überexpressionsstudie und jeder Produktionslauf viraler Vektoren hängt davon ab. Wenn Ihre Transfektion 5 % erreicht hat, Sie aber 30 % gebraucht hätten, haben Sie gerade eine Woche nachgelagerter Arbeit und Reagenzien im Wert von Tausenden Euro verschwendet.

Das Bittere daran: Oft merken Sie es erst Tage später, wenn das Experiment aus Gründen scheitert, die auf eine schlechte Transfektion zurückgehen, die Sie nie überprüft haben. Die Lösung ist denkbar einfach: Platte abbilden, positive Zellen zählen, Prozentsatz berechnen. Doch auch „denkbar einfach“ kostet Zeit, wenn Sie über mehrere Wells hinweg per Auge auswerten, und noch mehr, wenn Sie für Ko-Transfektionen doppelt positive Raten benötigen.

Cytely liefert Ihnen einfach und doppelt positive Prozentsätze in wenigen Minuten. Laden Sie Ihre DAPI- und Reporterbilder hoch, gaten Sie nach Intensität, und Sie haben eine belastbare Zahl. Bei zwei Plasmiden gatet Cytely beide Kanäle kreuzweise und zeigt Ihnen genau, wie viele Zellen beide Konstrukte erhalten haben, also die Zahl, die für Ihr nachfolgendes Experiment tatsächlich zählt.

So läuft der Assay ab

Zellkerne aus DAPI segmentieren → Intensität des Reporterkanals pro Zelle messen → über Intensitäts-Gating als transfiziert/nicht transfiziert klassifizieren. Bei Ko-Transfektion: auf jedem Reporterkanal gaten, um einfach- und mehrfach-positive Populationen zu identifizieren.

Was Sie bereitstellen

  • Ch1: DAPI
  • Ch2: Fluoreszenzreporter von Plasmid A (z. B. GFP)
  • Ch3+: zusätzliche Reporterkanäle (z. B. mCherry, BFP)

Was Sie erhalten

  • % transfizierte Zellen (einfach, doppelt oder mehrfach positiv)
  • Reporterintensität pro Zelle
  • Gesamtzellzahl

Einsatzbereit

Einzelplasmid, Multiplasmid-Ko-Transfektion (2+ Konstrukte), virale Transduktionseffizienz, beliebiges fluoreszierendes Reporterkonstrukt.

Für Unterstützung anfragen

Unterscheidung zwischen transienter und stabiler Expression.

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