Die Zählung von Parasiten innerhalb von Wirtszellen ist ein zentrales Auslesesignal in der Wirkstoffforschung gegen Parasiten. Der Anteil infizierter Zellen, die Anzahl der Parasiten pro Zelle oder die Intensität des Parasitensignals lassen sich allesamt auf eines reduzieren…
Das Zählen von Parasiten in Wirtszellen ist eine zentrale Messgröße in der Wirkstoffforschung gegen Parasiten. Prozent infizierter Zellen, Parasiten pro Zelle oder Parasitensignalintensität lassen sich alle auf eine Kennzahl zurückführen: die Parasitenlast pro Zelle.
Die technische Herausforderung besteht darin festzulegen, wo gemessen wird. Zunächst brauchen Sie eine Maske für die Wirtszellkerne, dann eine zytoplasmatische Maske; anschließend müssen Parasitenobjekte detektiert, den Zellen zugeordnet und Anzahl bzw. Intensität in jedem Kompartiment gemessen werden. Mit Allzweck-Tools ist das möglich, aber jedes neue Experiment erfordert Maskierung, Objektzuordnung und Anpassungen an der Pipeline.
Cytely automatisiert diesen Ablauf: Wirtszellkerne und Zytoplasma segmentieren, Parasitensignale detektieren und einzelnen Zellen zuordnen, Parasitenanzahl und -intensität pro Zelle messen und Kennzahlen pro Zelle berechnen. Das Ergebnis ist eine Parasitenlast pro Zelle, die Sie gegen die Dosis auftragen können, um Infektions- bzw. Abtötungskurven zu erstellen.
So läuft der Assay ab
Wirtszellen aus dem Zellmarkerkanal segmentieren → Parasiten als Puncta oder Objekte im Parasitenkanal detektieren → Parasiten den Wirtszellen durch räumliche Einschließung zuordnen → Parasitenlast pro Wirtszelle zählen und messen → über einen Schwellenwert für die Parasitenzahl als infiziert vs. nicht infiziert klassifizieren.
Was Sie bereitstellen
- Ch1: DAPI (Wirts- und Parasitenkerne)
- Ch2: Wirtszellmarker (z. B. Zellkörperfärbung oder zytoplasmatische IF)
- Ch3: parasitenspezifischer Marker (z. B. Anti-Parasiten-IF, GFP-exprimierender Parasit oder erregerspezifische Färbung)
Was Sie erhalten
- % infizierte Zellen pro Bedingung
- Parasitenanzahl pro Wirtszelle
- Gesamte Parasitenfläche pro Wirtszelle
- Mittlere Parasitenintensität pro Zelle
- Anzahl der Wirtszellen
Einsatzbereit
Intrazelluläre Protozoen-Infektion (z. B. Toxoplasma, Leishmania, Plasmodium, Trypanosoma), fluoreszenzmarkierte oder GFP-exprimierende Parasiten, Anti-Parasiten-IF-Färbung, Wirkstoffscreening für antiparasitäre Verbindungen, Wirt-Pathogen-Ko-Färbungspanels.
Für Unterstützung anfragen
Lebendzell-Infektionskinetik, Klassifizierung des Parasitenlebenszyklus-Stadiums, Motilitätsverfolgung extrazellulärer Parasiten.