Bakterielle Infektion ist ein Zahlenspiel, das Zelle für Zelle gespielt wird. Wie viele Wirtszellen wurden getroffen, und wie stark? Sehen Sie die Analyse in Aktion: https://youtube.com/watch?v=UEn5mqnrROk
Bakterielle Infektion ist ein Zahlenspiel, das Zelle für Zelle gespielt wird. Wie viele Wirtszellen wurden getroffen, und wie stark?
Der klassische Gentamicin-Protektionsassay trennt intrazelluläre von extrazellulären Bakterien, indem er alles abtötet, was sich außerhalb befindet. Das funktioniert, reduziert die Verteilung pro Zelle jedoch auf eine einzige Zahl. Ein Wirkstoff, der die Anzahl infizierter Zellen halbiert, sieht genauso aus wie einer, der die Last in jeder infizierten Zelle halbiert. Biologisch ist das nicht dasselbe.
Die Bildgebung erhält die Verteilung. Cytely segmentiert Wirtszellen und gibt die Infektionslast als Gesamtzahl der Bakterienzellen innerhalb jeder Wirtszelle aus. Infizierter Anteil, Lastverteilung und Verifizierung pro Zelle ergeben sich alle aus demselben Bild.
Genau diese Messgröße brauchen Teams, um Wirkstoffe, Stämme und Bedingungen zu priorisieren.
So läuft der Assay ab
Wirtszellen segmentieren → Bakterien als Subobjekte detektieren → über Differenzialfärbung als innen vs. außen klassifizieren → Anzahl, Fläche und Intensität pro Zelle messen.
Was Sie bereitstellen
- Ch1: DAPI (Wirtszellkerne)
- Ch2: Wirtszellmarker
- Ch3: bakterielle Markierung (GFP / mCherry / IF / pHrodo)
- Optional Ch4: nur extrazelluläre Gegenfärbung zur Unterscheidung innen/außen
Was Sie erhalten
- Bakterien pro Wirtszelle
- Gesamtes Bakteriensignal pro Zelle
- % infizierte Zellen
- % internalisierte vs. anhaftende Bakterien
Einsatzbereit
GFP/mCherry-exprimierende Stämme, IF-gefärbte fixierte Bakterien, pHrodo-markierte Lebendaufnahme, Innen/Außen-Differenzialimmunfärbung, Gentamicin-Protektions-Endpunkte.
Für Unterstützung anfragen
Lebendzell-Eintrittskinetik mit Subsekunden-Auflösung, intrazelluläre bakterielle Replikationszeitverläufe, Assays zur Translokation sekretierter Effektoren.