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1998년 Rogakou, Pilch, Orr, Bonner는 모든 DNA 이중가닥 절단이 히스톤 H2AX의 인산화를 유발하여 손상 부위에 눈에 보이는 병소를 형성한다는 사실을 발견했습니다. 병소 하나는 절단 하나에 해당합니다. 이는 지금도 알려진 가장 민감한 DNA 손상 마커로, milliGray 범위의 손상까지 검출하며 comet 어세이보다 수십 배 이상 민감합니다.

그럼에도 병소 계수는 여전히 대부분 수작업으로 이루어집니다. 논문에서는 연구자가 수백 개의 핵에서 점을 눈으로 세었다고 기술하는 경우가 흔합니다. 이는 지루하고 주관적이며, 연구 속도를 제한합니다.

Cytely는 핵당 병소를 검출하고 그 강도와 면적을 측정하며, 모든 데이터 포인트를 이미지와 연결합니다. 병소 수로 게이팅하고, 이상값을 클릭하면 실제 핵을 확인할 수 있습니다.

어세이 실행 방식

DAPI로부터 핵 분할 → 손상 마커 채널에서 병소 검출 → 핵별 계수 및 측정. TAF/TIF의 경우: γH2AX와 텔로미어 채널 모두에서 반점을 독립적으로 검출하고 세포별 계수한 뒤 공동국재화 비율 계산.

제공하실 데이터

  • Ch1: DAPI
  • Ch2: γH2AX 또는 53BP1 (IF)
  • 선택 사항 Ch3: 텔로미어 FISH 프로브 (TAF/TIF용)
  • 선택 사항 Ch4: 추가 손상 마커

제공되는 결과

  • 핵당 병소 수
  • 병소 강도
  • 병소 면적. TAF의 경우: 세포별 이중 채널 병소 공동국재화 비율
  • 세포당 소핵(MNi) 수 및 % 소핵 보유 세포 (CBMN)

바로 실행 가능

γH2AX 병소, 53BP1 병소, RAD51 병소, TAF/TIF(수 기반 공동국재화를 통한 텔로미어 연관 병소), 세포질 염색질 단편(CCF — 노화 참조), 미소핵(MNi) 계수 및 세포질 분열 차단 미소핵(CBMN) 어세이, 핵 돌출부 및 핵질 다리.

지원 문의

혜성 어세이(다른 이미징 방식), 생세포 DNA 손상 동역학.

DNA 손상 및 유전독성 (병소) 어세이 살펴보기 →