Voir un exemple de jeu de données →

En 1998, Rogakou, Pilch, Orr et Bonner ont découvert que chaque cassure double brin de l'ADN déclenche la phosphorylation de l'histone H2AX, formant un focus visible au site de la lésion. Un focus égale une cassure. Il reste le marqueur de dommages à l'ADN le plus sensible connu, capable de détecter des lésions jusqu'à l'ordre du milligray, soit plusieurs ordres de grandeur de plus que le test des comètes.

Et pourtant, le comptage des foci reste largement manuel. Les publications décrivent régulièrement des chercheurs comptant à l'œil des points dans des centaines de noyaux. C'est fastidieux, subjectif et limitant.

Cytely détecte les foci par noyau, mesure leur intensité et leur surface, et relie chaque point de données à l'image. Fenêtrez sur le nombre de foci, cliquez sur une valeur aberrante et visualisez le noyau réel.

Déroulement du test

Segmenter les noyaux à partir du DAPI → détecter les foci dans le canal du marqueur de dommage → compter et mesurer par noyau. Pour les TAF/TIF : détecter les spots dans les canaux γH2AX et télomérique indépendamment, compter par cellule, calculer le rapport de colocalisation.

Ce que vous fournissez

  • Ch1 : DAPI
  • Ch2 : γH2AX ou 53BP1 (IF)
  • Ch3 optionnel : sonde FISH télomérique (pour les TAF/TIF)
  • Ch4 optionnel : marqueur de dommage supplémentaire

Ce que vous obtenez

  • Nombre de foci par noyau
  • Intensité des foci
  • Surface des foci. Pour les TAF : ratio de colocalisation des foci bicanal par cellule
  • Nombre de micronoyaux (MNi) par cellule et % de cellules micronucléées (CBMN)

Prêt à l'emploi

Foci γH2AX, foci 53BP1, foci RAD51, TAF/TIF (foci associés aux télomères via colocalisation basée sur le nombre), fragments de chromatine cytoplasmique (CCF — voir Sénescence), comptage de micronoyaux (MNi) et test des micronoyaux à blocage de la cytokinèse (CBMN), bourgeons nucléaires et ponts nucléoplasmiques.

Sur demande

Test des comètes (modalité d'imagerie différente), cinétique des dommages à l'ADN en cellules vivantes.

Découvrir le test Dommages à l'ADN et génotoxicité (foci) →