Ver conjunto de datos de ejemplo →

En 1998, Rogakou, Pilch, Orr y Bonner descubrieron que cada rotura de doble cadena del ADN desencadena la fosforilación de la histona H2AX, creando un foco visible en el sitio del daño. Un foco equivale a una rotura. Sigue siendo el marcador de daño en el ADN más sensible que se conoce, capaz de detectar daños en el rango de los miligray, órdenes de magnitud más sensible que el ensayo cometa.

Y, sin embargo, el recuento de focos sigue siendo en gran medida manual. Los artículos describen de forma habitual a investigadores contando visualmente puntos en cientos de núcleos. Es tedioso, subjetivo y limita el ritmo del trabajo.

Cytely detecta los focos por núcleo, mide su intensidad y su área, y vincula cada punto de datos con la imagen. Seleccione por número de focos, haga clic en un valor atípico y vea el núcleo real.

Cómo se ejecuta el ensayo

Segmentar los núcleos a partir de DAPI → detectar los focos en el canal del marcador de daño → contar y medir por núcleo. Para TAF/TIF: detectar los puntos en los canales de γH2AX y de telómeros de forma independiente, contar por célula, calcular la relación de colocalización.

Lo que usted aporta

  • Ch1: DAPI
  • Ch2: γH2AX o 53BP1 (IF)
  • Ch3 opcional: sonda FISH de telómeros (para TAF/TIF)
  • Ch4 opcional: marcador de daño adicional

Lo que obtiene

  • Número de focos por núcleo
  • Intensidad de los focos
  • Área de los focos. Para TAF: proporción de colocalización de focos en dos canales por célula
  • Número de micronúcleos (MNi) por célula y % de células micronucleadas (CBMN)

Listo para ejecutar

Focos de γH2AX, focos de 53BP1, focos de RAD51, TAF/TIF (focos asociados a telómeros mediante colocalización basada en recuento), fragmentos de cromatina citoplasmática (CCF — véase Senescencia), recuento de micronúcleos (MNi) y ensayo de micronúcleos con bloqueo de citocinesis (CBMN), brotes nucleares y puentes nucleoplasmáticos.

Consúltenos para obtener soporte

Ensayo cometa (modalidad de imagen diferente), cinética de daño en el ADN en célula viva.

Explore el ensayo de Daño en el ADN y genotoxicidad (focos) →