La infección bacteriana es un juego de números que se juega célula a célula. ¿Cuántas células hospedadoras resultaron afectadas y con qué intensidad? Vea el análisis en acción: https://youtube.com/watch?v=UEn5mqnrROk
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La infección bacteriana es un juego de números que se juega célula a célula. ¿Cuántas células hospedadoras resultaron afectadas y con qué intensidad?
El ensayo estándar de protección con gentamicina separa las bacterias intracelulares de las extracelulares eliminando las que están fuera. Funciona, pero reduce la distribución por célula a un único número. Un fármaco que reduce a la mitad el número de células infectadas parece idéntico a otro que reduce a la mitad la carga dentro de cada célula infectada. No se trata de la misma biología.
La imagen conserva la distribución. Cytely segmenta las células hospedadoras e informa de la carga de infección como el recuento total de bacterias dentro de cada célula hospedadora. La fracción infectada, la distribución de la carga y la verificación por célula se obtienen de la misma imagen.
Esa es la lectura que los equipos realmente necesitan para clasificar compuestos, cepas y condiciones.
Cómo se ejecuta el ensayo
Segmentar las células hospedadoras → detectar las bacterias como subobjetos → clasificar interior frente a exterior mediante tinción diferencial → medir el número, el área y la intensidad por célula.
Lo que usted aporta
- Ch1: DAPI (núcleos de la célula hospedadora)
- Ch2: marcador de la célula hospedadora
- Ch3: marcaje bacteriano (GFP / mCherry / IF / pHrodo)
- Ch4 opcional: contratinción solo extracelular para discriminar interior/exterior
Lo que obtiene
- Bacterias por célula hospedadora
- Señal bacteriana total por célula
- % de células infectadas
- % de bacterias internalizadas frente a adheridas
Listo para ejecutar
Cepas que expresan GFP/mCherry, bacterias fijadas teñidas por IF, captación en vivo marcada con pHrodo, inmunotinción diferencial interior/exterior, criterios de valoración de protección con gentamicina.
Consúltenos para obtener soporte
Cinética de entrada en célula viva con resolución de subsegundo, cursos temporales de replicación bacteriana intracelular, ensayos de translocación de efectores secretados.