형질주입 효율에 관한 논문을 발표하는 사람은 없습니다. 이것으로 연구비를 따내는 사람도 없습니다. 하지만 모든 CRISPR 실험, 모든 과발현 연구, 모든 바이러스 벡터 생산 작업이 여기에 달려 있습니다. 30%가 필요했는데 형질주입이 5%에 그쳤다면, 일주일간의 후속 작업과 수천 달러의 시약을 낭비한 것입니다.

가혹한 점은, 확인하지 않은 형질주입 실패로 인해 실험이 실패한 며칠 후에야 이를 알게 되는 경우가 많다는 것입니다. 해결책은 지극히 간단합니다. 플레이트를 이미징하고, 양성 세포를 계수하고, 비율을 계산하면 됩니다. 하지만 "지극히 간단한" 작업도 여러 웰에 걸쳐 눈으로 점수를 매길 때는 시간이 걸리며, 공동 형질주입을 위한 이중 양성 비율이 필요할 때는 더욱 그렇습니다.

Cytely는 단일 양성 및 이중 양성 비율을 몇 분 만에 제공합니다. DAPI + 리포터 이미지를 업로드하고 강도로 게이팅하면 확실한 수치를 얻을 수 있습니다. 이중 플라스미드의 경우, Cytely는 두 채널을 교차 게이팅하여 두 구조체를 모두 받은 세포가 정확히 몇 개인지, 즉 후속 실험에 실제로 중요한 수치를 알려 줍니다.

어세이 실행 방식

DAPI로부터 핵 분할 → 세포별 리포터 채널 강도 측정 → 강도 게이팅으로 형질주입 여부 분류. 공동 형질주입의 경우: 각 리포터 채널에서 게이팅하여 단일 및 다중 양성 집단 식별.

제공하실 데이터

  • Ch1: DAPI
  • Ch2: 플라스미드 A 유래 형광 리포터(예: GFP)
  • Ch3+: 추가 리포터 채널(예: mCherry, BFP)

제공되는 결과

  • 형질주입된 세포 비율(%)(단일 양성, 이중 양성 또는 다중 양성)
  • 세포별 리포터 강도
  • 총 세포 수

바로 실행 가능

단일 플라스미드, 다중 플라스미드 공동 형질주입(2개 이상 구조체), 바이러스 형질도입 효율, 모든 형광 리포터 구조체.

지원 문의

일시적 발현과 안정적 발현의 구분.

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