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공동국재화 분석에는 평판 문제가 있습니다. 수년 동안 표준 관행은 적색 채널과 녹색 채널을 병합하고, 노란색을 찾은 뒤, 공동국재화라고 선언하는 것이었습니다. 이 접근법은 주관적이고, 이미지 밝기에 민감하며, 오해를 부르는 결과를 흔히 만들어 냅니다. 심사자도 알고, 편집자도 압니다. 그런데도 이 관행이 지속되는 이유는, 제대로 하려면, 즉 세포별로 Pearson 및 Manders 계수를 계산하려면 대부분의 실험 과학자들이 갖춰 두지 않은 도구가 필요하기 때문입니다.

Cytely는 이미지별이 아니라 각 세포 내에서 Pearson 상관계수 또는 Manders M1/M2 중첩 계수를 계산합니다. 이는 매우 중요합니다. 이미지별 계수는 모든 세포에 대해 평균을 내므로, 일부 세포는 강한 공동국재화를 보이고 다른 세포는 전혀 보이지 않는다는 사실을 가립니다. 세포별 계수는 분포, 즉 실제 생물학을 보여 줍니다.

또한 더 높은 특이성이 필요하다면, 분석을 특정 구획(핵 전용 또는 세포질 전용)으로 추가 제한할 수 있습니다.

약물이 세포 내 표적에 도달함을 입증하는 표적 관여 평가는 흔히 표지된 화합물과 표적 마커의 공동국재화에 의존합니다. 주관적인 "노란색 병합" 이미지는 규제 심사를 통과하지 못합니다. 이미지와 연결된 검증이 가능한 세포별 Pearson 계수는 통과합니다.

어세이 실행 방식

세포 분할 → 각 세포 내에서 Ch2와 Ch3 간 Pearson 상관관계 및 Manders 계수 계산. 필요에 따라 특정 구획(핵 전용 또는 세포질 전용)으로 분석을 제한.

제공하실 데이터

  • Ch1: DAPI
  • Ch2: 마커 A(IF 또는 형광 태그)
  • Ch3: 마커 B(IF 또는 형광 태그)

제공되는 결과

  • 세포별 Pearson 상관계수
  • 세포별 Manders M1/M2 중첩 계수
  • 양성 공동국재화를 보이는 세포 비율(%)
  • 세포별 채널 강도 비율

바로 실행 가능

수용체-리간드 공동국재화(예: EGFR + EGF), 소기관 접촉 부위(예: MitoTracker + ER-Tracker를 통한 미토콘드리아-ER), 경로 공동 활성화(예: 인산화 단백질 + 총 단백질), 약물 축적 국재화(예: 화합물 + 리소좀 마커), 구획 특이적 공동국재화(핵 전용, 세포질 전용).

지원 문의

객체 기반 공동국재화(반점 대 반점 공간 중첩 평가), 교차 상관 함수 분석, 3D 공동국재화.

단백질 공동국재화 및 공동 발현 어세이 살펴보기 →