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1882년, 엘리 메치니코프(Élie Metchnikoff)는 불가사리 유생에 장미 가시를 찔러 넣고 세포들이 몰려들어 가시를 삼키는 모습을 관찰했습니다. 세포가 이물질을 먹는다는 이 관찰은 선천 면역의 토대가 되었고, 1908년 그가 노벨상을 받는 데 기여했습니다.

한 세기가 넘도록 식세포작용은 교과서 속 면역학이었습니다. 중요하고, 기초적이며, 광범위하게 연구된 주제였습니다. 그러다 면역항암학이 판도를 바꾸었습니다. 종양 세포는 "나를 먹지 마(don't eat me)" 신호, 그중 가장 잘 알려진 CD47을 표시하여 스스로를 보호합니다. 항CD47, 항SIRPα, 항CD24 접근법을 포함한 새로운 세대의 치료제는 이러한 신호를 차단하여 대식세포가 다시 암세포를 삼킬 수 있게 하는 것을 목표로 합니다. 갑자기, 교과서에서 가장 오래된 면역 기전 중 하나가 신약 개발에서 가장 주목받는 판독값 중 하나가 되었습니다.

어세이 자체는 개념적으로 단순합니다. 식세포를 형광 표지된 먹이와 섞고, 이미징한 다음, 상호작용을 정량화합니다. 하지만 분석은 보기보다 어렵습니다. 식세포작용은 다른 객체 안에 있는 개별 객체, 즉 식세포와 연관된 먹이 입자를 계수해야 합니다. 세균 8개와 연관된 대식세포는 1개와 연관된 대식세포와 생물학적으로 매우 다르지만, 플레이트 리더는 둘 다 단순히 "양성"으로 보고할 수 있습니다. 벌크 형광은 그 분포를 하나의 숫자로 압축하여 생물학적 의미를 가립니다.

Cytely는 식세포를 분할하고, 각 세포 내의 하위 객체로 먹이 입자를 검출하며, 식세포별 먹이 수를 보고합니다. 이분법적인 양성/음성 판독값이 아니라 실제 단일 세포 분포입니다. 내재화 상태가 중요한 어세이에서는 pHrodo와 같은 pH 민감성 염료가 표면 결합 먹이와 실제로 내재화된 먹이를 구분하는 데 도움이 될 수 있습니다. 또한 플랫폼은 먹이의 이미지 다중도(image multiplicity of prey, iMOP)를 계산하여 먹이 밀도가 달랐던 웰 간에 정규화합니다.

어세이 실행 방식

식세포 분할 → 먹이 입자 검출 → 식세포별 먹이 수, 면적, 강도 측정. 내재화는 pH 민감성 염료(예: 내재화될 때만 형광을 내는 pHrodo)를 사용하거나 3D 중첩을 추정하여 평가할 수 있습니다. iMOP는 먹이 가용성 대비 식세포 활성을 정규화하기 위한 대조 지표를 제공합니다.

제공하실 데이터

  • Ch1: DAPI
  • Ch2: 식세포 마커 또는 세포 마스크
  • Ch3: 표지된 먹이(예: pHrodo 표지 세균, 형광 비드, 시냅토솜)

제공되는 결과

  • 식세포별 먹이 수
  • 세포별 총 먹이 면적
  • 식세포작용 양성 세포 비율(%)
  • 세포별 먹이 강도
  • 내재화 점수화(마커 또는 3D 추정을 통한 표면 결합 먹이 대 내재화된 먹이)
  • 먹이의 이미지 다중도(iMOP — 시료 내 먹이 대 세포 비율 추정치)

바로 실행 가능

대식세포, 미세아교세포, 호중구 또는 단핵구/THP-1 식세포작용. 비드 기반, 세균, 시냅토솜 삼킴, 세포자멸사물 제거(efferocytosis, 표지된 세포자멸 세포의 제거), 항체 의존성 세포 식세포작용(ADCP), 모든 표지된 먹이 어세이. pH 민감성 염료 또는 3D 추정을 통한 내재화 평가.

지원 문의

생세포 식세포작용 동역학, 식포 성숙 추적.

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