腫瘍学(オンコロジー)の創薬スクリーニングは、本質的に反復的です。化合物はテストされ、改良され、再テストされます。増殖データを当日中に受け取れるチームが、次の反復サイクルを回すことができます… 解析の実際の様子はこちら:https://youtube.com/watch?v=cnusK8DL80Y
腫瘍学の創薬スクリーニングは、本質的に反復的です。化合物はテストされ、改良され、再テストされます。増殖データをその日のうちに得られるチームは、翌日には次の反復を実行します。手作業のカウントに2日間待つチームは、発見の2日間を失います。
アッセイの実行方法
DAPIから核をセグメンテーション → 核ごとにEdUチャネルの強度を測定 → 強度ゲーティングによって陽性/陰性に分類。
ご用意いただくもの
- Ch1:DAPIまたはHoechst(全核)
- Ch2:EdU Click-iTまたはBrdU IFシグナル
得られるもの
- EdU陽性細胞の割合(増殖指数)
- 核ごとのEdU強度
- Ki67陽性細胞の割合(マーカーベースの増殖指数)
- 総細胞数
すぐに実行可能
EdU Click-iT、BrdU IF、Ki67 / Ki-67 増殖指数(Ki67陽性核の割合)、PCNA、EdU + 追加マーカー(例:Ch3-4のKi67、細胞型マーカー)。
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パルスチェイス二重標識実験。