20世紀のほとんどの期間、脂質滴は貯蔵された脂肪の不活性な塊として扱われてきました。その見方は、ペリリピンの発見とともに、ミレニアムの変わり目頃に覆されました… 解析の実際の様子はこちら:https://youtube.com/watch?v=k9OP8MAwC2k
20世紀の大半において、脂質滴は貯蔵された脂肪の不活性な塊として扱われてきました。その見方は、ペリリピンと脂質滴表面を覆うプロテオーム全体の発見により、ミレニアムの変わり目頃に覆されました。脂質滴は正真正銘のオルガネラです。それはシグナル伝達のハブであり、ウイルス集合の場であり、代謝と炎症をつなぐ細胞の要となる転換点でもあります。
そしてMASHは代謝性疾患における最大の未充足ニーズとなりました。世界の成人の4人に1人が脂肪肝を抱えています。Madrigal社のresmetiromが2024年に初のFDA承認を取得し、FGF21アナログ、GLP-1併用療法、SCD1阻害剤、THR-βアゴニストがひしめくパイプラインが、肝細胞アッセイで同じ問いを投げかけています。その化合物は脂質蓄積を減少させたのか、何個の細胞で、どの程度減少させたのか、と。
標準的な読み出しはBODIPY染色と画像です。ウェルごとのバルク蛍光は分布を平均化して消してしまいます。Cytelyは細胞をセグメンテーションし、すべての脂質滴を検出し、細胞ごとに数、面積、総脂質割合、強度を報告します。完全なサイズ分布が得られ、1つの巨大な脂質滴と50個の小さな脂質滴を区別できます。これは脂質分解と脂質滴の成熟にとって重要な違いです。
かつて単なる脂肪と見なされていたオルガネラは、いまや代謝創薬において最も多く測定される構造の1つとなっています。
アッセイの実行方法
細胞をセグメンテーション → 脂質チャネルで脂質滴を検出 → 細胞ごとに脂質滴の数、面積、強度を測定。
ご用意いただくもの
- Ch1: DAPI
- Ch2: 脂質色素(BODIPY 493/503、蛍光でのOil Red O、Nile Red)
- オプションのCh3: 細胞膜または細胞質染色
得られるもの
- 細胞ごとの脂質滴数
- 脂質滴の面積
- 総脂質面積割合
- 脂質滴の平均強度
すぐに実行可能
BODIPY、Nile Red、LipidTOX染色、明視野(Oil Red O)、追加マーカーによるマルチチャネル、脂肪細胞特異的な検出と定量。
サポートについてはお問い合わせください
3D脂質滴体積の推定、脂質滴の融合/分裂のトラッキング。